油茶CoALMT9基因的克隆与表达分析

卢梦琪, 谭晓风, 周俊琴, 渠心静, 张宸辉, 袁军*
中南林业科技大学, 经济林培育与保护教育部重点实验室, 经济林育种与栽培国家林业和草原局重点实验室, 经济林 培育与利用湖南省协同创新中心, 长沙410004

通信作者:袁军;E-mail: yuanjunchina@126.com

摘 要:

本研究以油茶良种‘华金’扦插苗根系为材料, 通过RT-PCR克隆出油茶铝激活的苹果酸转运蛋白基因家族一个成员, 命名为CoALMT9, 该基因的编码序列长1 761 bp, 编码586个氨基酸。利用ProtParam等软件进行生物信息学分析, 同时通过实时荧光定量PCR和亚细胞定位对该基因的表达模式和表达部位进行分析, 结果表明: CoALMT9蛋白的分子质量是66.84 kDa, 理论等电点是6.57, 为不稳定的非分泌蛋白; CoALMT9蛋白含5个跨膜区, 二级结构以α螺旋为主。实时荧光定量PCR结果表明, 铝毒(4 mmol·L-1 Al3+处理)诱导了CoALMT9在油茶根系中的表达, 在铝毒条件下添加1 mmol·L-1 PO43–能显著提高该基因表达水平。亚细胞定位分析确定CoALMT9所编码的蛋白质定位于液泡膜。该研究表明CoALMT9基因可能在油茶磷缓解铝毒过程中起作用, 为揭示其适应高铝低磷环境的分子机制提供参考。

关键词: 油茶; ALMT; 基因克隆; 生物信息学分析; 表达模式; 亚细胞定位

资助:湖南省科技重大专项(2018NK1030)和国家自然科学基金(31400582)。

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